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關(guān)于膜表面積和樣品量之間的關(guān)系有沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)法則?

發(fā)布時(shí)間: 2022-05-05  點(diǎn)擊次數(shù): 915次
  透析是指溶質(zhì)在濃度梯度的驅(qū)使下,選擇性擴(kuò)散通過(guò)半透膜,從而達(dá)到大/小分子分離,膜兩側(cè)濃度平衡,即小顆粒的溶質(zhì)通過(guò)膜,而大分子物質(zhì)不能通過(guò),被截留在膜另一邊。
  如果將樣品置于透析膜管內(nèi),通過(guò)置換膜管外部的透析緩沖液,可將小顆粒物質(zhì)清除,從而達(dá)到純化大分子物質(zhì)的目的。一般來(lái)說(shuō),一天之內(nèi)置換3-5次緩沖液,然后在室溫條件下,放在攪拌臺(tái)上隔夜透析,即可達(dá)到高效的透析結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)的透析操作一般需要16-24小時(shí)。許多因素會(huì)影響透析效率,包括:擴(kuò)散系數(shù)、pH值、溫度、時(shí)間、物質(zhì)濃度、樣品體積、透析緩沖液體積、透析緩沖液的置換次數(shù)、膜表面積、膜厚度、分子帶電荷及緩沖液攪拌速率。
  透析緩沖液的體積越大,小分子擴(kuò)散的驅(qū)動(dòng)力越大。我們一般推薦緩沖液和樣品的體積比為100:1。當(dāng)擴(kuò)散速率降低,膜兩側(cè)溶液趨于平衡時(shí),通過(guò)置換緩沖液,可維持小分子擴(kuò)散驅(qū)動(dòng)力和透析速率。我們一般推薦在12-24小時(shí)內(nèi),置換緩沖液2到3次,具體安排如下:
  第一次緩沖液置換:透析開始后2-3小時(shí)
  第二次緩沖液置換:透析開始后4-5小時(shí)
  最后一次緩沖液置換:透析隔夜之前
  關(guān)于膜表面積和樣品量之間的關(guān)系有沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)法則?
  表面積與體積的比值取決于膜管扁平寬度。如果有兩段相同長(zhǎng)度的膜管,扁平寬度較小的膜管具有較高的比表面積,而扁平寬度較大的膜管比表面積相對(duì)較小,也就是說(shuō),前者的透析速率更快。原因是扁平寬度較小的膜管,溶質(zhì)的擴(kuò)散距離較短,溶質(zhì)之間通過(guò)膜孔的競(jìng)爭(zhēng)也較小。而扁平寬度大,亦即溶質(zhì)到達(dá)膜表面的距離也較長(zhǎng),溶質(zhì)之間對(duì)膜孔的競(jìng)爭(zhēng)也較大。一般而言,比表面積越大,透析越快。
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