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二代測(cè)序酶在對(duì)DNA進(jìn)行測(cè)序時(shí)起到了重要作用

發(fā)布時(shí)間: 2023-06-16  點(diǎn)擊次數(shù): 1060次
  二代測(cè)序(Next-Generation Sequencing,NGS)是指使用高通量平臺(tái)同時(shí)對(duì)大規(guī)模DNA或RNA進(jìn)行快速、準(zhǔn)確、低成本的測(cè)序技術(shù)。在這個(gè)過(guò)程中,二代測(cè)序酶起到了重要作用。
  二代測(cè)序酶主要分為兩類:聚合酶和核苷酸轉(zhuǎn)移酶。
  1. 聚合酶
  聚合酶是進(jìn)行DNA擴(kuò)增的關(guān)鍵工具,在PCR (Polymerase Chain Reaction) 過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。其中最常見的是Taq DNA polymerase和Phusion DNA Polymerase兩種。
  Taq DNA polymerase即熱穩(wěn)定型聚合酶,能夠耐受較高溫度條件下的反應(yīng),并且擴(kuò)增產(chǎn)物含有A尾巴(Adenines),適用于目標(biāo)片段長(zhǎng)度較短且含有AT富集區(qū)域時(shí)使用;而Phusion DNA Polymerase則由多個(gè)不同來(lái)源的DNA polymerases組成復(fù)雜結(jié)構(gòu)體系,在保證特異性與靈敏度基礎(chǔ)上, 具備更好的擴(kuò)增效率、精準(zhǔn)性及拓展模板長(zhǎng)度等優(yōu)點(diǎn)。
  2. 核苷酸轉(zhuǎn)移 酶
  核苷轉(zhuǎn)移脫氧核糖體(Nucleotide Transfer and Deoxyribonucleotide Transfer)也稱為內(nèi)切酶,是一類蛋白質(zhì)酶,在DNA測(cè)序過(guò)程中扮演著重要的角色。這些內(nèi)切酶可以短小地識(shí)別和結(jié)合到DNA上,并在特定核苷酸位點(diǎn)處水解化學(xué)鍵,釋放出部分堿基或其它標(biāo)記物。
  總之, 二代測(cè)序酶作為高通量平臺(tái)進(jìn)行快速、準(zhǔn)確、低成本的基因組學(xué)研究所必備的關(guān)鍵工具, 具有極其重要和不可替換的作用。
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